江山牌卷烟按捺烟草诱导鼠沙门氏菌骤变的研究
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更新日期:2003年8月28日 吸烟损害健康已为很多试验所证实。开发低毒、安全型卷烟已成为烟草工业研究的首要目标。国内外研究安全型卷烟的计划首要有两种,即下降卷烟焦油含量或下
更新日期:2003年8月28日
吸烟损害健康已为很多试验所证实。开发低毒、安全型卷烟已成为烟草工业研究的首要目标。国内外研究安全型卷烟的计划首要有两种,即下降卷烟焦油含量或下降烟草焦油生物活性。一种可行的、有用的办法是在卷烟中增加抗氧化、抗畸变的中草药制剂。本研究组通过体系的试验已证实抗氧化、抗畸变的江山牌卷烟能够有用地按捺烟草诱导淋巴细胞SCE交流频率和微核构成。本试验使用Ames试验,研究江山牌卷烟对DNA骤变的拮抗性,为安全型卷烟的研发供给了必定的依据。
一、资料与办法
1.供试样烟
江山牌卷烟、空白卷烟(天津卷烟厂供给)。共2000支,置于调温调湿平衡箱中平衡72小时,挑取分量区别较小的卷烟备于试验。
2.卷烟叶组乙醇提取液制备:20支卷烟在25ml
95%乙醇中超声处理,布氏漏斗抽滤,兼并滤液,减压蒸馏浓缩至25ml。
3.试验分组:(1)空白卷烟组;(2)江山卷烟叶组组;(3)江山卷烟烟气组;(4)江山卷烟嘴棒组;(5)药物组;(6)二氨基芴阳性对照组;(7)95%酒精对照组。
4.菌株:选用鼠伤寒沙门氏菌TA98菌株为试验菌株(购于中国防止科学院劳动卫生研究所)。试验前按Ames试验规则的办法对菌株进行判定,判定后符合要求备用。
5.微粒体酶制备:用硫代巴比妥钠诱导大鼠,按Ames法制备S9混合液。
6.江山卷烟提取物致骤变性测定:
选用规范皿掺入法在加S9和不加S9活化体系下进行试验。试验分组如下:取不一样处理的提取物32μl参加到0.25mlS9混合物(或不加)中,并参加0.05ml菌液(1×107个菌/ml)混匀,置37℃水浴中30min活化。将预热45℃的1ml上层琼脂当即倒入上述已活化液内,摇匀倒入底层培育基上铺平。每种提取物作三个平皿,每种处理别离设置四个浓度:4lμl、8μl、16μl、32μl。用酒精作为阴性对照组,二甲基芴作阳性对照组。试验平皿放置温箱内,37℃培育72小时、记载回变菌落数。
组内作平均值以及提取物浓度与回复骤变的有关剖析,不一样浓度组间作方差剖析。
二、试验成果
对不一样处理的江山牌卷烟提取物诱导骤变进行测定,并对试验成果进行有关回归剖析和方差剖析。
1.不一样处理卷烟提取物与骤变菌落的有关回归剖析(略)。
2.不一样浓度江山牌卷烟提取物对菌落数目影响的方差剖析(略)。
三、讨 论
依据Ames试验原理,测验物试验成果存在浓度效应或高于对照组3倍,可判定为致骤变效果。本研究成果与其它专家有关研究成果共同。回归剖析标明空白卷烟提取物浓度与沙门氏菌骤变之间存在极显着的正有关性,空白卷烟提取物跟着浓度的提高,诱导沙门氏菌骤变越高;方差剖析显现,不一样浓度组间存在明显性区别,表现为浓度效应,而且32μl/皿浓度组骤变高于酒精对照组5倍,阐明烟草酒精提取物有致骤变效果。江山卷烟叶组组、江山卷烟烟气组有关剖析标明,提取物浓度与沙门氏菌骤变之间有弱的正有关,但方差剖析标明不一样浓度组间区别不明显,而且最高酒精提取物致骤变不高于酒精对照组3倍,阐明此二组提取物浓度与沙门氏菌骤变联系不亲近。江山卷烟嘴棒组和药物组试验标明浓度与沙门氏菌骤变间无有关,方差剖析也支持不一样浓度组间无明显性区别。本试验成果标明,江山卷烟叶组、烟气和嘴棒酒精提取物致骤变的效应低于空白烟草提取物,进一步证实增加有用的中草药成分是下降烟草毒害的主要手法。
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